考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)

考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)

【产品简介】

考马斯亮蓝染色试剂盒是以考马斯亮蓝G-250为主要成分，采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶（native gel）的染色和脱色。

采用常规染色方法需至少1小时可以完成染色；采用快速染色方法数分钟即可完成染色。本染色液经过改良，不含有毒的甲醇，但含有刺激性气味的乙酸。

【产品组成】

【使用方法】

一、常规染色脱色方法：

1. 电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝胶。

2. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时间。

注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚，温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近，在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2-4个小时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。

3. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。

4. 加入适量脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。

注：脱色液可以使用考马斯亮蓝脱色液；如果希望自行配制，推荐的脱色液配方为：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。

5. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。

注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。

6. 完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

二、 快速染色脱色方法：

1. 电泳结束后，取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。通常对于胶浓度大于10％的胶比较坚韧，在发生煮沸时不易破损；对于胶浓度小于10%的胶，宜尽量避免煮沸，以免出现胶碎裂的情况。

2. 随后在染色液温度较高的情况下，在室温摇床上摇动5-10分钟。

3. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。

4. 加入适量脱色液，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 

注：脱色液可以使用考马斯亮蓝染色脱色液(RTD6204)；如果希望自行配制，推荐的脱色液配方为：40%乙醇，10%乙酸，50％蒸馏水。

5. 微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾，立即停止加热。

6. 随后在脱色液温度较高的情况下，在摇床上摇动5-10分钟。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白条带。

7. 更换新鲜的脱色液，重复步骤5和步骤6，直至蓝色背景基本上全部被脱去，蛋白条带染色效果达到预期。

8. 完成脱色后，可以把凝胶保存在水中，用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨，可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

【注意事项】

1. 可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。

2. 本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。

3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作