JM109感受态细胞

大肠杆菌 JM 109感受态细胞

【产品简介】

JM 109感受态细胞是由JM 109菌种通过特殊方法处理得到的，适用于重组质粒或连接产物的转化。基因型为endA1 recA1 gyrA96 thi-1 relA1 supE44 hsdR17 (rK-,mK+) Δ(lac - proAB)/F' [ traD36 proAB+ laqIq lacZΔM15]。

JM 109感受态细胞recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。携带hsdR17基因型背景，使得异源DNA不被内源核酸酶系统降解。lacZΔM15的存在使JM 109可用于构建克隆，蓝白斑筛选实验。

【产品组成】

【使用说明】

1. 取出感受态细胞冰浴解冻，取50μl感受态细胞与1-10ng重组质粒或连接产物于ep管内混匀，冰浴30min。

2. 42℃水浴热冲击60s，迅速转移至冰浴2min。

3. 加入800μl LB培养基（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床，150 rpm 振荡培养 45 分钟使菌体复苏。

4. 取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的 SOC 或 LB 固体 琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于 37℃直至液体被吸收， 倒置培养，37℃培养 12-16 小时。

【注意事项】

1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的 DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的 DNA 总量较少，可取 20 μL 转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心（3000 rpm ，3 分钟）后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。

2. 感受态细胞不可反复化冻。

3. 热冲击时不要摇动ep管。