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一、慢病毒基本介绍

重组慢病毒载体由于其结构特点,具有如下特点:1)长时间表达:它对分裂细胞和非分裂细胞均有感染能力,几乎可以感染所有种类细胞,并整合到宿主细胞的基因组,不会随着细胞分裂传代而丢失,长时间稳定表达。因此,慢病毒常用于在人源、小鼠、大鼠、猴、猪等物种稳定高表达/沉默特定基因。2)安全性高:未发现致病性,已被用于CAR-T 治疗作用于人体,取得了较好临床效果;3)免疫原性低: 直接注射活体组织不易造成免疫反应,适用于动物实验。

我公司生产的慢病毒经浓缩后滴度高,最高可达到109TU/ml次方级别,并可选择不带荧光,带GFP绿色荧光,Dsred红色荧光。为了方便动物体内活体成像观察,我们公司也具有携带萤火虫荧光素酶基因的慢病毒液,使目标细胞在动物体内观察更直观。

 

二、慢病毒感染效果


我公司生产慢病毒对宿主细胞具有较高的感染效率,以下为代表性感染效果



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三、业务分类


1. 过表达慢病毒

过表达慢病毒液包括编码蛋白基因、lncRNA、circRNA、miRNA和CAR-T慢病毒液;对于编码蛋白基因的过表达,客户可根据需要选择Flag, HA, Myc, V5, 6x His等标签。

 

2. shRNA敲低慢病毒

shRNA技术是最常见的基因敲低方法,通过将靶点基因构建到慢病毒也表达载体中,干扰片段在U6启动子的作用下转录

3. CRISPR-Cas9敲除慢病毒

CRISPR-Cas9技术是基因敲除的有效手段之一,CRISPR-Cas9基因敲除实验结果可靠、重复性较高,脱靶效果低等。

 

四、业务流程




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五、成功案例

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如图所示,在低表达p21细胞A中利用慢病毒转导技术进行过表达,结果显示成功过表达

在高表达p21细胞B中利用shRNA慢病毒转导技术进行敲低,结果显示p21被有效敲低

 

 

 

六、注意事项

1. 病毒可在-80℃长期储存;若长时间未使用,滴度会降低,因此建议客户首次订购小包装。

2. 反复冻融会降低病毒滴度,为避免反复冻融建议按照每次的使用量对病毒进行分装。

 


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