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过表达慢病毒稳转株
一、基本介绍
稳转株的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,进行长时间的稳定表达用载体中所含抗性基因进行筛选。我司常用的真核表达载体抗性筛选标志物为嘌呤霉素筛选得到可稳定过表达目的蛋白。
过表达慢病毒稳转株服务是将客户的基因CDS序列、lncRNA、circRNA、miRNA转接到慢病毒载体上,通过包装获得过表达目的基因的慢病毒颗粒;过表达慢病毒产品适用人源、小鼠、大鼠等物种的基因表达。
二、技术优点
·适用范围广:可用于各种哺乳动物细胞。
·稳定:目标基因以及整合到宿主基因组中,不会随细胞复制而丢失。
·迅速:最快可控制在1个月以内完成构建。
·质量保证:对外源基因进行严格鉴定。
三、服务流程
1·客户提供目的基因的序列信息、目的基因的模板等相关材料;以及其他特殊要求(标签、荧光等)
2·过表达载体构建;病毒包装与纯化、滴度检测
3·感染目的细胞,并筛选鉴定。
4·交付客户
四、成功案例
1)感染效果
2)mRNA和蛋白水平检测结果
如图所示,利用我司过表达慢病毒稳转株构建技术在H460细胞中稳定过表达SUN2基因
(A.mRNA水平检测;B.蛋白水平检测)