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shRNA敲低细胞株构建
一、基本介绍
慢病毒几乎可以感染所有种类的细胞,并且在感染后可以整合到目的细胞基因组,进行长时间的稳定表达,因此,慢病毒常用于制备沉默特定基因的细胞株。shRNA敲低技术可以用于编码蛋白的基因,lncRNA和circRNA等,我公司制备的慢病毒带有嘌呤霉素抗性,感染目的细胞后,可通过加入进行筛选,获得稳定敲低的细胞株。
二、技术优势
·适用范围广:可用于各种哺乳动物细胞。
·稳定:目标基因以及整合到宿主基因组中,不会随细胞复制而丢失。
·迅速:最快可控制在1个月以内完成构建。
·质量保证:对外源基因进行严格鉴定。
三、服务流程
1·客户提供目的基因、目的细胞的信息以及其他特殊要求(荧光基因等)
2·进行目的细胞的转染以及敏感性检测
3·进行病毒载体的构建和病毒包装、纯化和浓缩
4·感染目的细胞,筛选和鉴定
5·交付客户
四、成功案例
1)感染效果
Scr shSUN2
2)mRNA和蛋白水平检测结果
如图所示;利用我司shRNA敲低细胞株构建服务在H1975细胞中稳定敲低SUN2基因
(A.mRNA水平检测结果;B.蛋白水平检测)