CRISPR-Cas9敲除文库

一、CRISPR-Cas9敲除文库原理

CRISPR-Cas9敲除文库是高通量的筛选的一种方式，它比过去shRNA敲低文库筛选更加有效。基本原理是将不同基因的sgRNA和Cas9质粒混合在一起，通过慢病毒转导的方式感染目标细胞，而后通过筛选，使目标细胞感染单一的sgRNA和Cas9慢病毒颗粒（如下图）

（图片来源于公开发表论文，非本公司绘制）

二、应用领域

1）新药靶点确定与验证；

2）耐药机制筛选；

3）病毒感染受体鉴定

4）肿瘤增殖和转移关键基因鉴定

5）蛋白调控分子网络绘制

三、文库类型

1）全基因组敲除文库

2）人激酶敲除文库