双荧光素酶基因报告实验

双荧光素酶报告基因系统是由萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）和海肾荧光素酶（Renilla luciferase）分别催化底物发生物荧光，并通过专业设备检测发光信号强弱，进而灵敏、高效地检测基因的表达。是研究转录因子与目的基因启动子区DNA相互作用、miRNA与靶基因3’UTR、lncRNA及circRNA调控关系一种检测方法。

检测过程

应用领域

1. miRNA与circRNA调控关系双荧光素酶报告实验

该实验主要用于研究circRNA作为作为Sponge吸附miRNA，并通过双光素酶报告实验来反映其调控关系。将circRNA克隆至双荧光素酶表达载体上，而后与miRNA共转染细胞中，而后检测双荧光素酶的活性。

2. miRNA与lncRNA调控关系双荧光素酶报告实验

该实验主要用于研究lncRNA作为作为Sponge吸附miRNA，并通过双光素酶报告实验来反映其调控关系。将lncRNA克隆至双荧光素酶表达载体上，而后与miRNA共转染细胞中，而后检测双荧光素酶的活性。

3. miRNA与靶基因3’UTR调控关系双荧光素酶报告实验

miRNA可以通过结合在下游靶基因的3’UTR区域进而抑制靶基因的翻译过程。将靶基因的3’UTR克隆至荧光素酶载体中后，通过miRNA与携带靶基因3’UTR的荧光素酶重组质粒共转染细胞后，坚持其酶活性变化，进而反应该基因是否收到miRNA的调控

4. 转录因子与靶基因启动子调控关系双荧光素酶报告实验

研究转录因子与启动子的调控关系实验中，常常会使用双荧光素酶基因报告实验系统去验证该启动子是否是转录因子的调控区域。该方法是将靶基因的启动子克隆到荧光素酶报告基因起始密码子前面，并于转录因子共转染到细胞中，并检测其活性变化情况。