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常见细胞功能学检测实验



一、CCK-8实验

CCK8检测实验室细胞检测细胞增殖的常见的实验之一,它主要通过CCK-8试剂取处于对数生长期的细胞,按照每孔约1000个细胞的密度培铺在96 孔板中,在一定时间内加入10μl的 CCK-8溶液继续培养1小时,在酶标仪450nm读取相应OD值,连续测量5天,并在制作生长曲线。

 

二、克隆形成实验

克隆形成是体外检测细胞增殖等能力的一种方式,在肿瘤学研究中较为常见,主要通过在6孔板中种1000个左右细胞,在培养箱连续培养15天左右,而后经过甲醇固定和染色的过程

 

三、Transwell实验

Transwell实验是检测细胞迁移和侵袭能力的一种实验,一般实验前细胞需要进行饥饿处理,而后加入一定细胞数目到小室中,该小室底部为含有10 % FBS的DMEM,细胞置于常规细胞培养条件中培养24 h后,用甲醇固定15 min,1 %结晶紫染色30 min,用自来水清洗后于室温晾干后于光学显微镜下(100X)随机选取3个视野计算迁移、侵袭细胞数。

 

四、划痕实验

划痕实验是检测细胞迁移能力的一种实验技术,通常在6孔板或12孔板中进行,实验前铺入密度约60%;24小时之后更换为无血清的培养基,将细胞饥饿6小时;用200微升枪头划痕及显微镜下拍照,并用1%的FBS进行培养;分别在24小时和48小时后显微镜下拍照。

 


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